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一、儲存條件控制

1. 未使用 SPE 柱的儲存
   • 保持密封狀態，避免柱內填料受潮或被空氣中的雜質污染。不同類型填料（如 C18、硅膠、離子交換樹脂）需按說明書要求儲存，例如硅膠基質柱需防潮，應存放在干燥器或密封袋中，相對濕度控制在 30%-60%。
   • 控制儲存溫度，多數 SPE 柱需在室溫（15-30℃）下存放，避免極端高溫（>40℃）或低溫（<0℃），防止填料結構破壞（如化學鍵合相脫落）。
2. 已開封未用完 SPE 柱的儲存
   • 若單次實驗未用完一根 SPE 柱（如部分樣品量較少的情況），需用合適的溶劑（如正己烷、甲醇）沖洗柱床后密封，防止填料干涸。例如反相柱可用甲醇 - 水（9:1）保存，正相柱可用正己烷保存。
   • 標記開封日期和剩余容量，優先使用近期開封的柱子，避免長期存放導致性能下降。

二、使用過程中的操作規范

1. 活化與平衡階段
   • 嚴格按照方法要求選擇活化溶劑，確保填料充分溶脹。例如反相 C18 柱需用甲醇活化（去除殘留雜質并濕潤填料），再用樣品溶劑（如水或緩沖液）平衡，避免直接上樣導致填料疏水塌陷。
   • 活化時控制流速（通常 1-5mL/min），避免溶劑快速流過導致柱床未充分浸潤，可通過重力滴加或固相萃取裝置的壓力調節實現。
2. 上樣與淋洗操作
   • 上樣體積不超過 SPE 柱的最大吸附容量，避免樣品過載導致目標物穿透。若樣品體積較大，可分多次上樣，每次確保前一次樣品進入柱床后再添加。
   • 淋洗溶劑的選擇需匹配填料類型，避免目標物被誤淋洗。例如離子交換柱淋洗時，需控制溶液 pH 值，防止目標離子提前洗脫。同時，淋洗流速不宜過快，確保雜質充分被沖洗。
3. 洗脫階段
   • 洗脫溶劑應足量且能有效溶解目標物，通常分多次洗脫（如 2-3 次），每次洗脫液流過柱床后再添加下一次，提高回收率。例如用 5mL 洗脫溶劑可分 2 次（3mL+2mL）進行，減少溶劑用量的同時保證洗脫效率。
   • 避免洗脫時用力擠壓柱體或使用過高壓力，防止柱床壓實、填料顆粒破碎，導致流速異常或樣品污染。

三、清潔與維護

1. 柱體外部清潔
   • 使用后及時擦拭柱管外壁，去除殘留的樣品或溶劑（尤其是腐蝕性溶液，如酸、堿），防止柱管老化或標簽脫落。
   • 固相萃取裝置（如 manifold）與 SPE 柱連接的接口需定期清潔，用純水或有機溶劑沖洗，避免交叉污染。
2. 柱床維護
   • 若發現柱床出現氣泡或干裂，需立即停止使用，此類情況多因活化不充分或溶劑干涸導致，繼續使用會導致流速不均、目標物吸附 / 洗脫效率下降。
   • 避免樣品中含有顆粒物，上樣前需經 0.45μm 或 0.22μm 濾膜過濾，防止顆粒堵塞柱床，導致流速驟降。若柱床已堵塞，可反向用溶劑緩慢沖洗（僅限可反沖的 SPE 柱），無效則需更換。

四、性能監控與更換標準

1. 日常性能檢查
   • 每次使用前觀察 SPE 柱外觀，若發現柱管破裂、填料泄漏或柱床塌陷，直接棄用。
   • 通過空白實驗監控柱內污染：用活化 - 洗脫流程處理空白溶劑，檢測洗脫液中是否有干擾峰，若存在雜質峰且超過方法允許范圍，說明柱子受污染，需更換。
2. 回收率與重復性監控
   • 定期用標準品進行回收率驗證，若同批次 SPE 柱的回收率波動超過 10%（或方法規定范圍），可能是柱子性能下降，需排查原因（如活化不充分、填料失效），必要時更換新柱。
   • 記錄每根 SPE 柱的使用次數，多數 SPE 柱為一次性使用，但部分高容量柱可重復使用（需驗證重復性），重復使用前需用強溶劑清洗（如甲醇 - 乙酸乙酯混合液），避免交叉污染。

五、其他注意事項

• 不同品牌、型號的 SPE 柱結構存在差異，需嚴格遵循廠家提供的操作指南，避免混用不同類型柱子的維護方法（如聚合物基質柱與硅膠基質柱的活化溶劑不同）。
• 實驗結束后及時清理廢棄 SPE 柱，分類處理（如含有機溶劑的柱子需按危險廢物處理），避免環境污染。